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等离子体基因分子导入系统

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细胞转染是将外源核酸(DNA、RNA、siRNA等)导入真核细胞的过程,分为瞬时转染 (短期表达)和稳定转染(整合到基因组长期表达)。
核心步骤包括:核酸递送:通过物理、化学或生物方法穿透细胞膜屏障;胞内释放:核酸 从递送载体中解离并进入细胞质或细胞核;表达调控:外源基因转录翻译或RNA干扰靶基因。
 
 
为什么选择等离子体基因导入?
当气体被加热或受强电磁场作用时,原子或分子失去电子,形成带正电的离子和自由电子的混合体。等离子体基因导入利用放电产生的等离子向细胞内瞬时导入基因片段或分子的 技术。本技术不需要特殊的试剂或病毒,快速有效地进行基因导入。 研究表明,等离子体可诱导细胞发生胞吞作用,这使得基因导入接近更自然的方式,减少对细胞的刺激。
转染方法对比:
 
 
目前传统的转染方法包括:脂质体转染法,病毒转染和电穿孔法,相比于这些传统的方法, 等离子体基因导入的方法具有多方面的优势。
 

技术特点

 

①安全性 / 细胞低毒性 通过细胞的胞吞作用,在不损伤细胞 膜和染色体的情况下实现基因导入。 此外,导入的基因难嵌入细胞基因组, 因此降低细胞癌变或免疫反应等副作 用的发生风险,安全地进行基因导入。

 

 

②高导入率与高细胞存活率 由于本方法具有细胞低毒性且不易损伤 细胞,因此基因导入后细胞有高存活率。 在维持细胞存活率大50%以上的情况下, 导入率可达50%以上,针对某些细胞类型 可以达到更高的导入率。

 

④性价比高 LINACYTE 3MC 不需要特殊设备或昂 贵的试剂,运行成本低。 每孔的成本 约为 1 元,并且可以在现有的研究环 境中轻松实施。 对于专用试剂,只需 将缓冲液即可与质粒混合后添加,从 而实现简单高效的实验过程。

 

③操作便捷快速 去除96孔板的培养基,加入DNA溶液 并进行等离子照射即可。无需依赖操 作者的技术、高成本试剂或大量细胞 准备,操作可在数分钟内完成,大幅 提升实验效率。

 

LINACYTE 3MC 等离子基因导入方法在多种细胞中成功应用

 
 
贴壁细胞系 悬浮细胞系 原代细胞 干细胞(iPS细胞)

向鱼卵细胞中导入绿色荧光基因

 

 

可向其他方法难以转染的鱼卵细胞和植物细胞中进行基因导入

 

 

向植物细胞中导入绿色荧光基因

 

 
应用领域:
 
 
 
等离子基因导入同其他转染方法一样,其应用领域广泛且多样,涵盖基础研究、 医学治疗、生物制药、农业等多个方向。
基础科学研究
基因功能研究:通过转染技术将外源基因导入细胞,研究该基因在细胞中的功能、表达调控、亚细胞定位等。
基因敲除和沉默:通过转染技术导入含有特定基因敲除或沉默序列的质粒,研究特定基因的敲除或沉默对细胞生长、分化、凋亡等的影响。
报告基因系统构建。通过荧光蛋白(如GFP)或酶(如荧光素酶)标记,检测基表达水平或启动子活性。
细胞分化和命运决定:通过转染技术导入与细胞分化命运相关的基因或调控元件,研究细胞的分化、凋亡、自噬等过程。
基因治疗
病毒感染研究:将病毒基因导入细胞系,研究病毒感染细胞的机制、抗病毒药物的作用机理等。
肿瘤研究:将与肿瘤相关的基因导入肿瘤细胞系,研究肿瘤细胞的恶性转化、肿瘤耐 药性、肿瘤免疫等。
生物制药与疫苗开发
疫苗生产:将病毒抗原基因导入合适的细胞系,通过转染技术获得可表达病毒抗原的细胞系,用于制备疫苗。
药物筛选:通过转染技术将药物靶点基因导入细胞系,用于筛选能够与药物靶点结合的药物候选物。
生产细胞系:在生产重组蛋白药物、抗体药物等过程中,通过转染技术将目的基因导入生产细胞系,获得可稳定表达目的药物的细胞系。
疾病机制研究
疾病模型构建。在细胞中表达突变基因(如致癌基因KRAS),模拟疾病发生。
合成生物学与新兴技术研究
人工基因回路。设计复杂基因网络,实现细胞行为编程。
细胞重编程。转染转录因子诱导体细胞转化为多能干细胞。